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血氨

基本信息

  • 专科分类： 消化
  • 检查分类： 肝功能检查
  • 适用性别： 男女均适用
  • 是否空腹： 　空腹
  • 手术参考价： 20元
  • 科　室： 消化

血氨检查简介

人体内的氨是蛋白质代谢过程中通过氨基酸脱氨基，肾脏使谷氨酰胺分解和肠道内细菌的作用而生成。大部分氨在肝内通过鸟氨酸循环合成尿素。一部分被用于酮酸的氨基化，合成谷氨酰胺，在肾内形成铵盐从尿中排出。血氨在诊断治疗肝昏迷、肝性脑病中占重要地位，尿中氨测定是估价体内酸碱平衡紊乱的指标之一，血氨的测定方法有离子交换树脂法、直接法、电极法及酶法，其中酶法以其简单、特异性高而被广泛应用。

血氨检查过程

取材：血液

血氨的测定原理：血浆氨的酶法测定基于下列反应：

在过量α-酮戊二酸、NAD（P）H和足量谷氨酸脱氢脱氢酶（GLDH）条件下，酶促反应的速率，即NAD（P）H转变成NAD（P）＋使340nm吸光度的下降速率与反应体系中氨的浓度呈正比关系。

试剂：全部试剂必须用去氨水制备。去氨水用蒸馏水经氢型阳离子交换树脂处理获得。

（1）66.7mmol/LKH2PO4溶液：取9.12gKH2PO4溶入去氨水中，定溶到1L，4℃保存。

（2）66.7mmol/LNa2HPO4溶液：取9.51gNa2HPO4溶解并加去氨水到1L，4℃保存。

（3）pH8.0（±0.05），66.7mmol/L磷酸盐缓冲液（PB）：取5ml“1”液及95ml“2”液，混合，4℃保存，稳定3周。

（4）310mmol/Lα-酮戊二酸：取0.45gα-酮戊二酸，溶于5ml去氨水中，用3mol/L氢氧化钠调pH至接近5.0时，改用0.1mol/L氢氧化钠调pH至6.8（±0.01），切勿调得过碱，因高pH可破坏α-酮戊二酸，以去氨水稀释到10ml，4℃稳定10天；

（5）NADPH贮存液：称约10mgN-ADPH（－20℃、干燥器保存）溶于1mlPB中取出50μl，以PB稀释到5ml为工作液，以PB调零，1cm光径，在340nm波长读NADPH工作液的吸光度，计算NADPH贮存液中实际浓度：

6.22为NADPH的毫摩尔吸光系数，据上式计算结果确定制备GLDH工作液中加入NADPH贮存液的量，使达到149μmol/L。

（6）GLDH工作液：根据GLDH酶制品（－20℃干燥器中保存）的比活，称出酶活力为992U的相应量（如比活为50U/mg蛋白，则称20mg），如GLDH在甘油中，可按U/ml吸出992U的相应体积，置50ml量瓶中，称入ADP（－20℃，干燥器中保存）15mg，吸入计算量的NADPH贮存液，以PB稀释到50ml，4℃保存可稳定7天；

（7）氨标准贮存液，100mmol/L：称取（NH4）2SO4660.7mg，溶于去氨水定容到100ml，4℃保存；

（8）氨标准应用液：用去氨水分别稀释贮存液成25、50、100、及150μmol/L。

操作方法：所用分光光度计需配有37℃恒温比色系统及340nm波长。如用自动分析仪，可根据本法反应条件自行设计，样品及试剂用量按比例减少。操作见表1，按B、S、U管先后顺序进行。

混匀，于10s时读A10s于70s时读A70s，求各管的△A，即△A＝A10s－A70s。

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