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细菌的鉴定

基本信息

  • 专科分类: 消化
  • 检查分类: 生化检查
  • 适用性别: 男女均适用
  • 是否空腹:  非空腹
  • 手术参考价: 20元
  • 科 室: 消化

细菌的鉴定检查简介

细菌的鉴定是对细菌进行各方面的检查。例如:细菌对于碳水化合物的代谢试验、吲哚试验、淀粉的水解等各种试验。

细菌的鉴定检查过程

一.吲哚试验

方法:以接种环接种待试细菌的新鲜斜面培养物于邓亨氏蛋白胨溶液中,37℃培养24~48小时后(可延长4~5天)。于培养液中加入戊醇或二甲苯2~3ml,摇匀,静置片刻后,沿试管壁加入试剂2毫升。在戊醇或二甲苯下面的液体变红色者为阳性反应。

也可将一指头大的脱脂棉,滴上两滴欧立希氏试剂,再在同处加滴两滴高硫酸钾(K2S2O4)饱和水溶液,置于含培养液的被检试管中,离液面约半寸,置烧杯内水浴煮沸为止,脱脂棉上出现红色为阳性。此法略繁,但省试剂且准确,因为将试剂加到液体中,吲哚和粪臭素均呈阳性,而用此法,只是吲哚(它能挥发)呈阳性反应。

亦可以滤纸片浸湿1%的二甲基苯丙烯甲醛的10%浓HCl溶液,然后以接种环刮取一环琼脂的纯培养物涂布于该滤纸上。

细菌涂印周围呈蓝色者为阳性,细菌涂印周围无色泽变化或淡黄色者为阴性。

二.淀粉的水解

淀粉在酸的催化作用下,能发生水解;淀粉的水解过程:先生成分子量较小的糊精(淀粉不完全水解的产物),糊精继续水解生成麦芽糖,最终水解产物是葡萄糖。

对剂:碘化钾2g蒸馏水300ml

培养基:将细菌接种在平板上,置37度温箱中培养24h,加革兰氏碘液于菌落上,观察颜色变化,呈蓝色者为阴性,无蓝色为阳性。

三.β-半乳糖苷酶试验

试剂:0.75MONPG溶液:取80mg溶于15ml蒸馏水中,在加入缓冲液(6.9gNaH2P04溶于45ml蒸馏水中,用30%NaOH调整pH为7.0,再加水至50ml)5ml,置4℃冰箱中保存。

方法:取纯菌落用无菌生理盐水制成浓的菌悬液,加入0.25mlONPG液,置35℃水浴20min至3h,观察结果。

结果判定:通常在20~30min内显色。出现黄色为阳性反应。

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